TA克隆是把外源基因与克隆载体进行体外连接,继而转化宿主细胞,筛选出含有目的基因重组质粒的转化子,并将该转化子大量扩增提取重组质粒的过程。迈浦生物拥有成熟的DNA克隆技术和完善的服务流程,可以根据序列特点和客户需要选用TA克隆、平端克隆、酶切克隆等多种克隆方法进行DNA克隆,帮您提高科研工作效率
PCR产物TA克隆服务
将PCR产物通过TA克隆直接连接到T载体上。
PCR扩增及TA克隆服务
客户提供模板以及扩增相关信息,由我们设计合成引物并进行后续的PCR扩增,将PCR产物连接到T载体上
使用pTG19-T载体,如果需要使用其他T载体,请注明。
PCR产物纯化、克隆后,筛选三个以上阳性克隆,送一个进行测序反应,判断测序结果是否正确的依据是:送测克隆中含有大小相符的插入片段,并可以看到客户的引物序列(只要包含其中一侧引物)。由于模板来源的不同和PCR过程中可能会引入突变,不保证序列是否与客户期望完全相符。
一次收费内容只包含PCR纯化,连接转化,克隆筛选,一次测序反应,及质粒和穿刺菌。当克隆片段大于600bp时,需要测通全序列,按照正常对外测序要加收相应的测序及合成中间测序引物的费用。
如果客户使用含3'→5' 外切酶活性的聚合酶扩增所得到的PCR产物,我们需要重新扩增PCR产物.
如果使用其它T载体,则需根据载体价格适当加费。
载体构建是分子生物学研究中最常用到的手段之一。但由于影响因素较多,对研究者经验要求较高,因而往往费时费力。我公司凭借长期分子生物学工作的丰富经验,集中人力,为您提供高效、快捷的服务!可根据已有载体进行改造方案的设计,完成现有载体不同功能元件的改造,也可以应客户要求将指定片段亚克隆至各载体。
从克隆载体上酶切下目的基因片段。
目的基因亚克隆至原核/真核表达载体中。
严格的质量控制,构建的质粒测序验证无误。
拥有丰富的表达载体构建服务经验。
客户自带的载体需提供详细的酶切图谱及相关信息。
由于某些基因表达产物会抑制宿主菌生长。因此,我们不保证所有的基因都能够高效表达。
客户请提供载体改造的具体要求,预进行改造的质粒(序列经测序验证正确)及其图谱和序列,能够获得所需元件或基因的模板(质粒或其它)及其相关图谱和序列。
对于载体改造和基因片段克隆,客户需要提供载体、PCR产物或酶切产物、以及载体来源及基因背景资料等。