什么是接力PCR（RelayPCR^TM）？

请先浏览下图。上期【新技能】的主角（OmegaPrimer）会出现哟~

Phase1 Target Capture

在RelayPCR^TM体系中，预先加入反应所需的所有引物：特异性引物（specific primer）和通用引物（common primer）。Specific primer是不是很眼熟，没错，它就是上期介绍的omegaprimer。

1. 特异性的omega primer引物对与模板序列（template DNA）结合，进行2个Cycle的特异性扩增；要仔细查看上图中序列的颜色变化哦。

2. 2个Cycle扩增完毕后，omega primer的3p臂，5p臂，和环（loop）序列都已融入扩增子中，并完成了目标序列的捕获。

还记得这个loop吗？loop的序列可不是任意设计的，它与Phase 2 Library Amplification中使用的通用引物序列相同（见图中右下角）。2个Cycle结束时，通用引物的互补序列已纳入扩增子序列的两端。

Phase 2 Library Amplification

目标序列捕获阶段完成后，即自动进入文库扩增阶段。

1. 体系中的通用引物（common primer），与扩增产物上的互补序列结合，进行文库扩增。根据实验需要，可在通用引物的尾部（tail segment）设计指定的序列，如测序引物，barcode等。

2. 当所有的扩增循环结束后，目标序列的文库即制备完成。如为靶向测序文库，经纯化后，即可上机测序，无需进行额外的接头连接和扩增反应。

现在你知道什么是RelayPCR^TM了吗？

RelayPCR^TM：一次PCR反应即可同时完成目标序列捕获（TargetCapture）与文库扩增（Library Amplification）。

是不是so easy，so happy呢！