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Fosmid/Cosmid文库

Fosmid/Cosmid文库

Fosmid文库简介

Fosmid 载体是现在流行的用于替代 Cosmid 载体构建大片段文库的新载体,Fosmid文库的构建更简单,快速。由于插入了大肠杆菌致育因子F-因子,所以它在宿主菌中以单拷贝形式存在,稳定性好。Fosmid载体上有一个可诱导的oriV高拷贝复制起始点,需要时可诱导达到高拷贝 (50个左右) 。随机性好,保证了每段DNA在文库中出现的频率均等。近年来,Fosmid文库已被广泛应用于基因的图位克隆、物理图谱的构建和比较基因组研究中。

应用领域

(1)全基因组的物理图谱构建;

(2)基因功能及表达调控的研究;

(3)重要性状基因的图位克隆和基因结构及功能的分析;

提供材料具体要求

(1) DNA样品或组织样品

(2) 样品需求量:DNA总量 ≥ 50 μg,DNA主带 ≥ 40 Kb或者35-45 Kb左右; 样品浓度:≥ 50 ng/μl;样品纯度:OD260/280= 1.8~2.0;DNA溶液肉眼观察无明显杂质;

技术服务流程

Fosmid文库流程

样本的QC―――高质量基因组DNA的提取,基因组DNA的打断处理―――打断后的DNA连接到载体―――.连接产物的包装和侵染大肠杆菌细胞―――osmid文库的检测:检测库容量(总CFU);随机挑取16个克隆子,抽提质粒,酶切检测插入片段大小与阳性率。

我们提供的服务结果

建好的fosmid文库的甘油菌液(含20%甘油的LB培养基),随机克隆子的质粒酶切鉴定电泳图,文库构建报告。

质量标准:滴度:大于1*10^5;阳性率:大于90%;平均插入片段:大于35Kbp

服务周期

35个工作日内。

服务报价

32000.00元